Методы лабораторной диагностики болезни Ньюкасла
Болезнь Ньюкасла – высоко контагиозная вирусная болезнь птиц отряда куриных. Инфекция характеризуется поражением органов дыхания, пищеварения и центральной нервной системы. При данной болезни также отмечают высокий уровень летальности. Возбудитель инфекции РНК-содержащий вирус при низких температурах (в зимний период) сохраняется в птичниках до 140 суток, в летний период до 7 суток. Прямые солнечные лучи лишают вирус жизнеспособности в течение 2 суток.
Источником возбудителя данной инфекции являются больные и перенесшие болезнь птицы. В естественных условиях болезнь регистрируют чаще у цесарок, индеек, павлинов, фазанов. Факторами передачи возбудителя могут послужить перо, пух, яйцо, полученные от больных птиц, тушки вынужденно убитых особей, зараженная микробами, бактериями, болезнетворными клетками подстилка, корм. Возбудитель внедряется в организм восприимчивой птицы посредством потребления зараженных кормов и воды, а также воздушно-капельным путем при совместном содержании больного и здорового поголовья.
Клиническими проявлениями болезни являются:
повышенная температура тела;
отказ от корма, слабость;
слизистые выделения из ротовой, носовой полостей, имеющие резкий неприятный запах;
жидкий помет с примесью крови и желчи;
расширение зоба;
дыхание с открытым клювом, хрипы, «карканье», чиханье;
поражение центральной нервной системы (скручивание шеи, отвисание хвоста и крыльев, дезориентация).
Для подтверждения диагноза применяют комплекс методов, которые позволяют выделить возбудителя, идентифицировать его и определить наличие антител в сыворотке крови.
Для анализа используют патологический материал от павшей или убитой с диагностической целью птицы. Берут фрагменты внутренних органов: головной мозг, трахею, лёгкие, селезёнку, печень, почки. Материал берут в первые часы после гибели или убоя, соблюдая правила асептики. Также для серологических исследований берут пробы крови из подкрыльцовой вены.
К основным методам лабораторной диагностики относятся:
1. Выделение и идентификация вируса. Из патологического материала готовят 10%-ную суспензию на физиологическом растворе с добавлением антибиотиков. Полученными разведениями (1:10 и 1:1000) заражают куриные эмбрионы (обычно 9–11-дневные). Характерным признаком поражения является гибель эмбрионов через 20–76 часов с кровоизлияниями. Аллантоисную жидкость от заражённых эмбрионов исследуют на гемагглютинирующую активность. Для идентификации используют реакцию торможения гемагглютинации (РТГА) с эталонными сыворотками. Также применяют реакцию нейтрализации (РН) и реакцию связывания комплемента (РСК).
2. Молекулярно-биологические методы. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет обнаружить фрагменты генома вируса в клиническом материале. Метод высокоспецифичен и чувствителен, он не зависит от предшествующей вакцинации. Для повышения точности применяют ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) и детекцией в режиме «реального времени».
3. Серологические исследования (на антитела). Иммуноферментный анализ (ИФА) позволяет выявить специфические антитела в сыворотке крови больных, переболевших или подозреваемых в заболевании птиц. ИФА также используют для ретроспективной диагностики и оценки эффективности вакцинации.
При подозрении на болезнь Ньюкасла необходимо немедленно сообщить в государственную ветеринарную службу и направить в лабораторию патологический материал и сыворотку крови.
Полезные ссылки
